■ 基本信息
啟動(dòng)子: | Trc/lac |
復(fù)制子: | ColE1 ori |
終止子: | rrnB T1 terminator |
質(zhì)粒分類: | 大腸桿菌載體；PET系列表達(dá)質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 5.2kb |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | N-CKS,C-6×His，N-P3C |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37℃，有氧，LB |
表達(dá)宿主: | BL21(DE3) |
誘導(dǎo)方式: | IPTG或乳糖及其類似物 |
5'測(cè)序引物:
| 5 ATC CAT GTT GCT GTT GCT CAG G 3
|
3'測(cè)序引物: | 5 GAT TTA ATC TGT ATC AGG 3 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類型: | ORF
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
pTrc-CKS表達(dá)載體采用E.coliTrc啟動(dòng)子和蛋白質(zhì)工程改造過CKS (CTP:CMP-3-deoxy-D-manno-octulosonate cytidylyltransferase or CMP-KDO synthetase)基因融合表達(dá)，同時(shí)選用人鼻病毒14亞型3C蛋白酶專一性切割位點(diǎn)。CKS融合表達(dá)是美國(guó)Abbot公司的專利，CKS融合蛋白研制成功HIV和HCV重組抗原并取得FDA認(rèn)證在美國(guó)上市。CKS是一個(gè)非常穩(wěn)定且高度可溶的理想融合伴侶。本發(fā)明除去掉CKS C端8個(gè)氨基酸外，還將C端Met突變成Thr。
■ 質(zhì)粒圖譜
